【摘 要】
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目的建立一种快速、敏感、特异的大肠杆菌O157:H7的定量检测方法。方法根据GenBank公布的O157:H7大肠杆菌rfbE基因序列,应用分子生物学软件进行序列比对,在该基因的保守区设计引
【机 构】
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绍兴文理学院医学院,浙江省疾病预防控制中心
【基金项目】
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浙江省卫生厅医药卫生科学研究基金资助(No.2005A102)
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目的建立一种快速、敏感、特异的大肠杆菌O157:H7的定量检测方法。方法根据GenBank公布的O157:H7大肠杆菌rfbE基因序列,应用分子生物学软件进行序列比对,在该基因的保守区设计引物和TaqMan探针,对荧光定量PCR反应条件进行优化,建立实时荧光定量PCR检测大肠杆菌O157:H7的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行了评价。结果所有大肠杆菌O157:H7菌株的检测结果均为阳性。而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达1cfu/μL。重复性检测的变异系数均小于5%。在模
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