PRRSV浙江株ORF5基因的原核表达与免疫原性分析

来源 :浙江农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xianglikai
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根据GenBank中公布的PRRSV基因序列(EU709837),设计一对PCR引物,以浙江分离株为模板,通过RT-PCR扩增出ORF5基因全序列。以PCR技术构建了缺失信号肽及三处跨膜区的重组ORF5基因,命名为g-ORF5。将g-ORF5基因定向克隆到原核表达载体pET-28a中,转化人E.coli菌株BL21。经酶切和测序鉴定后,阳性菌株用1mol/L IPTG诱导表达,用Ni-NTA纯化表达的重组蛋白。结果表明,重组GP5蛋白在大肠杆菌中获得表达。纯化后经ELISA和Dot-ELISA分析,表达蛋
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