鸡MxA基因的克隆、表达及生物学活性检测

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyanxia8521
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目的:克隆鸡MxA基因,构建其原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达融合蛋白。方法:采用RT-PCR方法从鸡成纤维细胞(CEF)中扩增MxA,将其克隆至克隆载体pMD18-T中,筛选阳性克隆后回收目的片段,将其克隆人原核表达质粒pGEX-6p—1,构建其重组表达质粒pGEX—MxA,以IPTG诱导表达,经SDS—PAGE、鸡胚新城疫病毒干扰试验和VSV-CEF微量细胞抑制试验进行分析、鉴定。结果:经RT—PCR扩增获得的MxA序列与GeneBank报道的序列一致,SDS—PAGE和干扰试验证实重组质粒可以
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