探讨雌二醇对十二指肠黏膜碳酸氢盐分泌的影响,观察雌二醇作用的雌激素受体(ER)亚型。
方法取4周龄C57雄性小鼠16只,分成对照组和雌二醇组,每组8只。采用化学发光法检测小鼠血清雌二醇水平;实时荧光定量PCR检测十二指肠组织中囊性纤维化穿膜传导调节蛋白(CFTR)、溶质载体家族26(SLC26)A3和SLC26A6 mRNA的表达。采用实时荧光定量PCR分别检测雌二醇加ERα或ERβ阻断剂,以及雌二醇作用于沉默ERα或ERβ 24、48 h后SCBN细胞CFTR、SLC26A3和SLC26A6 mRNA的表达。采用高速离子成像系统观察雌二醇对SCBN细胞分泌碳酸氢盐的影响,以及雌二醇对沉默ERα和ERβ后SCBN细胞分泌碳酸氢盐的影响。采用t检验、秩和检验进行统计学分析。
结果雌二醇组小鼠血清雌二醇水平高于对照组[(4 874±942) pmol/L比(657±187) pmol/L],差异有统计学意义(t=-11.579,P<0.01)。雌二醇组小鼠十二指肠CFTR、SLC26A3和SLC26A6 mRNA水平均高于对照组(0.856±0.302比0.452±0.246,2.910±1.680比1.120±0.540,1.272±0.667比0.319±0.114),差异均有统计学意义(t=-2.317、-2.483、-3.721,P均<0.05)。雌二醇加ERβ阻断剂作用24、48 h后CFTR mRNA和SLC26A6 mRNA水平均低于雌二醇作用24、48 h(CFTR mRNA:0.171±0.059比0.522±0.260,0.111±0.014比0.578±0.297;SLC26A6 mRNA:0.486±0.289比1.118±0.571,0.492±0.231比1.551±0.605),差异均有统计学意义(tCFTRmRNA=2.974、2.655,tSLC26A6 mRNA=2.393、3.272;P均<0.05)。沉默ERα加入雌二醇作用24、48 h后CFTR、SLC26A3和SLC26A6 mRNA水平均高于沉默ERα组(作用24 h:5.073±2.270比1.185±0.494,1.796±1.168比0.468±0.108,3.085±1.357比0.706±0.347;作用48 h:5.025±1.998比1.185±0.494,1.557±0.653比0.468±0.108,3.290±1.750比0.706±0.347),差异均有统计学意义(t24 h=-4.122、-2.773、-4.162,t48 h=-4.604、-4.034、-3.250;P均<0.05)。与沉默ERα组相比,沉默ERα组加入雌二醇作用24、48 h后碳酸氢盐分泌均增加,pH值均升高(0.35±0.17比0.72±0.17、1.15±0.25),差异均有统计学意义(t=-6.516、-12.387,P均<0.01)。
结论雌二醇主要通过ERβ上调十二指肠黏膜上皮细胞碳酸氢盐转运蛋白的表达,促进十二指肠黏膜碳酸氢盐的分泌。