【摘 要】
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目的研究LINC01018参与结肠癌发病的具体机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠癌组织和细胞以及癌旁组织和细胞中LINC01018的表达差异情况。建立稳定过表达LINC01018的HT-29细胞株。利用RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测LINC01018与E2F1蛋白之间是否存在相互作用。利用双荧光素酶实验检测E2F1对CDK6启动子的调控作用。在过表达LINC01018的HT-29细胞中同时上调E2F1或CDK6表达，再通过CCK-8实验、Transwell实验、Wester
【机 构】
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目的研究LINC01018参与结肠癌发病的具体机制。
方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠癌组织和细胞以及癌旁组织和细胞中LINC01018的表达差异情况。建立稳定过表达LINC01018的HT-29细胞株。利用RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测LINC01018与E2F1蛋白之间是否存在相互作用。利用双荧光素酶实验检测E2F1对CDK6启动子的调控作用。在过表达LINC01018的HT-29细胞中同时上调E2F1或CDK6表达，再通过CCK-8实验、Transwell实验、Western blot方法检测HT-29细胞的增殖、侵袭、迁移以及细胞中CDK6及MMP-2蛋白表达情况。
结果LINC01018在结肠癌组织及细胞中异常低表达。RIP实验结果显示，LINC01018与E2F1蛋白存在相互作用。双荧光素酶实验结果表明，E2F1蛋白能够增强CDK6启动子工作效率，E2F1对CDK6存在正调控作用；而LINC01018的过表达能够减弱E2F1对CDK6的正调控作用。回复实验显示，上调E2F1或CDK6表达能够减弱LINC01018过表达对HT-29细胞增殖、侵袭、迁移及CDK6、MMP-2蛋白表达的影响。
结论LINC01018在结肠癌组织及细胞中异常低表达。LINC01018可能通过E2F1/CDK6/MMP-2轴调控HT-29细胞增殖、侵袭及迁移，并参与结肠癌的发病。
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