A53Tα-synuelein与Ⅱ型单胺囊泡转移体相互作用的鉴定

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目的 鉴定A53Tα-synuclein(A53T-SYN)与Ⅱ型囊泡单胺转移体(VMAT2)在体外分子间的相互作用,为研究α-synuclein在帕金森病(PD)发病机制中的作用提供依据.方法 大肠杆菌BL21中表达带GST标签的A53T-SYN蛋白,考马斯亮蓝染色和Westem印迹检测蛋白质的表达,以该蛋白为诱饵,通过GST-Pull Down鉴定A53T-SYN与人脑提取物中的VMAT2在体外分子间的作用.结果 考马斯亮蓝染色和Western印迹检测到GST-A53T-SYN在大肠杆菌中的高效表达.GST-Pull Down实验后的Western印迹检测发现与A53T-SYN作用的VMAT2蛋白.结论 A53T-SYN与VMAT2在体外存在着分子间的相互作用。

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