【摘 要】
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目的 观察短期低氧应激对血管内皮细胞的影响.方法 制作血管内皮细胞低氧应激模型,采用低细胞毒性的染料Alamar Blue染色法测定常氧和低氧培养条件下的细胞活力,采用流式细胞
【机 构】
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第三军医大学西南医院烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室,第三军医大学西南医院病理学研究所
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目的 观察短期低氧应激对血管内皮细胞的影响.方法 制作血管内皮细胞低氧应激模型,采用低细胞毒性的染料Alamar Blue染色法测定常氧和低氧培养条件下的细胞活力,采用流式细胞技术检测细胞周期,采用膜联蛋白V-荧光素/碘化丙锭(Annexin V-fluorescein/PI)双标记法检测细胞凋亡,应用蛋白免疫印迹方法(Western blot),检测细胞内缺氧诱导因子和增殖细胞核抗原的表达.结果 短期低氧(1～3h)应激可以增强血管内皮细胞活力,细胞周期显示细胞4倍体峰比例增高,随着低氧时间的延长(6～12 h),细胞4倍体峰回落至常氧水平.短暂低氧(3h),细胞凋亡比例明显增高.蛋白免疫印迹检测显示,缺氧诱导因子-1α和增殖细胞核抗原在低氧后表达增高,与低氧反应呈时间效应依赖关系.结论 短期低氧启动了以增殖和活力增高为特征的血管内皮细胞适应性反应,同时也诱导了以细胞凋亡为特征的细胞损伤性反应.
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