探讨烟酸对p38MAPK通路介导的内皮细胞功能障碍的早期干预作用及可能机制。
方法人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)，用Medium200培养基培养，实验分组：①阴性对照组：培养基；②溶血磷脂酰胆碱(LPC)不同作用时间组：培养基中加入终浓度为20 μmol/L的LPC，分别培养10 min、8 h、24 h；③LPC＋p38MAPK的抑制剂(SB203580)组：培养基中加入SB203580 10 μmol/L培养1 h，再分别加入LPC培养10 min、8 h、24 h；④LPC＋不同剂量烟酸组：培养基中分别加入终浓度为0.25、0.5、1 mmol/L烟酸培养18 h，再加入LPC培养10 min、8 h及24 h。应用Western blot定量分析检测内皮细胞磷酸化的p38MAPK(pp38MAPK)、细胞间黏附分子(ICAM－1)蛋白含量，实时定量PCR方法检测内皮细胞ICAM－1 mRNA表达，细胞免疫荧光方法检测LPC诱导的ICAM－1蛋白表达。
结果ICAM－1的蛋白表达LPC 24 h组为0.786±0.021，LPC＋烟酸(1 mmol/L)组培养24 h为0.487±0.015，LPC＋SB203580组培养24 h为0.461±0.011，LPC＋烟酸组和LPC＋SB203580组均低于LPC 24 h组，差异有统计学意义(F＝6.3，P<0.01)，但均未达到阴性对照组水平(0.134±0.012)。pp38MAPK蛋白在LPC 10 min组最高，为0.47±0.02，烟酸能降低pp38MAPK，LPC＋烟酸(1 mmol/L)组为0.07±0.02，LPC＋SB203580为0.11±0.02，均低于LPC 10 min组(F＝91.91，P<0.01)。加入LPC培养8 h后，ICAM－1mRNA的表达(8.16±0.15)，高于阴性对照组(1.00±0.02)，差异有统计学意义(t＝24.34，P<0.01)；与LPC培养8 h比较，烟酸降低LPC诱导的ICAM－1mRNA的表达，LPC＋烟酸(1 mmol/L)组为3.85±0.14(F＝8.06，P<0.01)，而SB203580则不能有效的降低ICAM－1的mRNA的表达(8.09±0.11)。
结论在LPC诱导的HUVECs中，ICAM－1的蛋白与mRNA的表达均明显增强，pp38MAPK蛋白明显增强，烟酸干预可降低ICAM－1的蛋白与mRNA的表达，同时亦可降低pp38MAPK的蛋白表达，p38MAPK的抑制剂SB203580仅能降低ICAM－1的蛋白的表达，而不能影响其mRNA表达，其作用机制有待进一步研究。