【摘 要】
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目的 探讨人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)储存库激活剂的体外激活效应,为临床应用提供参考.方法 分离得到健康供血者外周血中的CD4+T细胞,构建HIV-1潜伏感染的原代细胞模型.用不
【机 构】
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中山大学生物医学工程学院,广东广州,510080;中山大学中山医学院,广东广州,510080
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目的 探讨人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)储存库激活剂的体外激活效应,为临床应用提供参考.方法 分离得到健康供血者外周血中的CD4+T细胞,构建HIV-1潜伏感染的原代细胞模型.用不同浓度(0.5、1、2μmol/L)的帕比司他(Panobinostat)、伏立诺他(SAHA)(Vorinostat)、BIX-01294、JQ-1、Bryostatin-1、GS-9620、地西他滨(Decitabine)、戒酒硫(Disulfiram)、Sirolimus分别处理细胞,在不同作用时间(1、3、5 d)后利用流式细胞分析仪检测每种药物对HIV-1储存库细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达效率及细胞存活率,并确定每种激活剂的最佳激活浓度和作用时间.结果 通过对由HIV-1启动子驱动的GFP表达效率及细胞存活率的统计分析,明确了在该细胞模型中这9种HIV-1储存库激活剂的最佳作用浓度和作用时间:Panobinostat的最佳激活浓度为1μmol/L,最佳作用时间为3 d;SAHA的最佳激活浓度为2μmol/L,最佳作用时间为1 d;JQ-1、Bryostatin-1和GS-9620在该模型中的最佳激活浓度均为1μmol/L且最佳作用时间均为1 d;BIX-01294、Decitabine、Disulfiram、Sirolimus在该模型中的最佳激活浓度均为0.5μmol/L且最佳作用时间均为1 d.横向对比发现,浓度为1μmol/L,作用时间为3 d的Panobinostat与浓度为0.5μmol/L,作用时间为1 d的Sirolimus在这9种药物中的激活效率最高,且对细胞存活无明显影响.结论 系统比较确认了9种病毒储存库激活药物在体外细胞模型中的激活效率,及最佳作用浓度和时间,为后续这些药物的临床实验研究提供重要参考.
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