【摘 要】
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应用基因敲除技术的方法和原理，通过PCR扩增B群脑膜炎球菌轨卫基因及载体pGBKT7上的Kan抗性片段，lpxL2片段与puc-18载体连接得到重组质粒msb—puc，以重组质粒msb—puc为基础，分别
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
【基金项目】
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云南省自然科学基金资助项目（2009ZC168M）.
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应用基因敲除技术的方法和原理，通过PCR扩增B群脑膜炎球菌轨卫基因及载体pGBKT7上的Kan抗性片段，lpxL2片段与puc-18载体连接得到重组质粒msb—puc，以重组质粒msb—puc为基础，分别通过反向PCR和酶切2种方法构建lpxL2基因中间片段的缺失，并在缺失位点连入Kan抗性表达盒，从而得到重组质粒mpK，mpK转化B群脑膜炎球菌，并用PCR的方法对转化子进行初步筛选鉴定，初步确定突变株1株．本研究通过基因敲除MenB中LPS合成途径相关基因lpxL2的方法，降低LPS毒性，为B群脑膜炎球
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