短发夹RNA对SMMC-7721肝癌细胞株ICAM-1基因表达的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ymlazy63
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目的 探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1,CD54)基因的短发夹结构RNA(shRNA)表达载体pGenesil-1/CD54对SMMC-7721肝癌细胞株CD54表达的抑制作用.方法 设计CD54基因shRNA片段和阴性对照shRNA片段,构建pGenesil-1/CD54和阴性对照表达载体,载体在coli菌扩增、鉴定后,转入SMMC-7721细胞.应用免疫组织化学技术检测肝癌细胞中CD54基因的表达.结果 阳性和阴性表达载体酶切,电泳有65 bp和4.9kb条带,载体插入片段测序,与设计序列相同,表达载体构建正确.免疫组织化学检测表明,阴性对照表达载体转染SMMC-7721细胞,细胞膜和细胞质着黄色和棕色,pGenesil-1/CD54转染SMMC-7721细胞,不着色或着淡黄色.结论 CD54的shRNA能特异性地抑制CD54在肝癌细胞SMMC-7721中的表达。

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