人参皂甙Rd通过PI3K/AKT/mTOR/Hif-1α通路促进成年大鼠缺血性脑卒中后的血管发生

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目的:探索人参皂甙Rd(Ginsenoside Rd,GSRd)对成年大鼠缺血性脑卒中血管发生的作用及可能机制。方法:80只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,体重280~300 g,用线栓法建立局灶性短暂性大脑中动脉阻塞模型(focal transient middle cerebral artery occlusion,MCAO),Sham为手术但不阻塞。随机分为四组,每组20只:Sham+生理盐水(SA)、Sham+GSRd、MCAO+SA、MCAO+GSRd。术后3 d,通过RECA-1免疫荧光组织化学染色标记血管内皮细胞、并计算梗死灶周围微血管的密度和分支点。通过Western Blot检测梗死侧皮层血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),低氧诱导因子(hypoxia-inducibal factor 1 alpha,Hif-1α),磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR),磷酸化的蛋白激酶B(p-protein kinase B,pAKT)的蛋白表达水平。结果:(1)免疫荧光组织化学染色结果显示:与MCAO+SA对照组相比,MCAO+GSRd治疗组的血管数(518.75±34.88/mm~2 vs 391.40±17.66/mm~2,P<0.001)和分支点(255.47±36.05/mm~2 vs 203.13±12.05/mm~2,P<0.01)显著增多。Sham+SA和Sham+GSRd的血管数(503.12±45.32/mm~2 vs 492.18±61.93/mm~2)和分支点(270.31±35.94/mm~2 vs 258.59±42.25/mm~2)则无显著差异;(2)Western Blot结果显示:与对照组相比,GSRd显著增加VEGF,Hif-1α,p-mTOR,p-AKT的蛋白表达水平(P<0.05)。(3)mTOR特异性阻断剂雷帕霉素抑制了GSRd对Hif-1α(P<0.01)、VEGF(P<0.05)的作用。结论:人参皂甙Rd可促进成年大鼠脑卒中后的血管发生,其对血管发生的作用可能是通过PI3K/AKT/mTOR/Hif-1α通路所介导。
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