应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wooicheang
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目的构建肝癌及癌旁肝组织差异表达基因的消减cDNA文库。方法采用新近建立的抑制消减杂交方法,以肝癌组织及癌旁肝组织作为对比材料,分离肝癌组织中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物用电穿孔法转化大肠杆菌进行文库扩增后,随机挑取100个白色克隆用菌落PCR进行鉴定。结果扩增消减cDNA文库获得3000余个白色阳性克隆,随机挑取100个白色克隆用PCR进行扩增,95%的克隆中均有100~600bp的插入片段,这些片段可能是肝癌差异表达基因的cDNA片段。结论用SSH法及T/
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