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目的 建立微生物法测定乳清蛋白粉类样品中叶酸含量的分析方法.方法 利用叶酸标准品制作叶酸标准曲线.将样品进行超声处理得到样品溶液.试管中加入等体积的培养基和不同体积的样液,稀释至10 mL,得到样品待测液.样品待测液和叶酸标准曲线溶液被灭菌后,加入鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus casei spp.rhamnosus)CICC 6224菌悬液进行培养,将培养物混匀后测其吸光度,根据标准曲线计算相应的叶酸含量,并进行方法的空白实验、检出限、精密度、重复性、稳定性及回收率实验.结果 叶酸标准曲线在0.1010～1.0103 ng/mL范围内线性良好,相关系数r2=0.99373,符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范》的要求,该方法的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为3.8％(n=6),平均回收率为102.5％(n=3).结论 该方法稳定、准确,适用于测定乳清蛋白粉类样品中的叶酸含量.