论文部分内容阅读
目的 构建不同组织来源雪旺细胞(Schwann cells,SCs)及化学去细胞异体神经(chemically extractedacellularnerve allograff,CEANA)移植物,比较其修复周围神经缺损的效果.方法 4周龄SD大鼠3只,体重80～120g,体外培养、扩增和鉴定BMSCs及脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs).体外诱导BMSCs和ADSCs分化为类雪旺细胞(dMSC,dADSC),并采用胶质细胞标记物p75和抗胶原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)进行鉴定.取出生3 d SD大鼠10只,体重6～8 g,分离培养SCs.20只成年Wistar大鼠,体重200～250 g,取双侧约20 mm坐骨神经制备CEANA.40只成年雄性SD大鼠,制备左侧15 mm坐骨神经缺损模型,根据神经缺损修复方法不同随机分为5组(n=8):A组,取自体坐骨神经翻转后吻合;B组,取15 mm CEANA吻合后补充5 ×105个SCs:C组,取15 mm CEANA吻合后补充5×105个dMSC;D组,取15 mm CEANA吻合后补充5×105个dADSC;E组,取15 mmCEANA吻合.术后12周行感觉和运动功能恢复评价及组织学评价.结果 BMSCs和ADSCs表面抗原标志为CD34-、CD45-、CD90+.经诱导后BMSCs和ADSCs形态变化与SCs相似,呈双极、星形结构,SCs标记物p75和GFAP均表达阳性.术后12周,A、B、C、D、E组肢体50%州缩阈值分别为(13.8±2.3)、(15.4±6.5)、(16.9±5.3)、(16.3±3.5)和(20.0±5.3)g,A组与E组比较差异有统计学意义(P0.05).A、B、C、D、E组小腿三头肌收缩力恢复率分别为87.0%4±9.7%、70.0%±6.6%、69.0%±6.7%、65.0%±9.8%和45.0%±12.1%,A、B、C、D组与E组比较差异有统计学意义(P<0.05).各组远端吻合口神经坚牢蓝染色显示神经纤维排列整齐,无炎性反应.甲苯胺蓝染色和透射电镜观察显示,B、C、D组有髓神经纤维计数及有髓神经纤维髓鞘厚度均大于E组,差异均有统计学意义(P<0.01);B组轴突直径大于C、D组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CEANA补充dADSC修复周围神经缺损与补充dMSC和SCs具有类似的修复效果.dADSC来源广泛,可作为组织工程神经理想的种子细胞,在复合CEANA修复周围神经缺损发挥重要作用.