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目的
评价Toll样受体4(TLR4)在新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡中的作用。
方法取出生1～3 d的SD新生大鼠心肌细胞，在含20%胎牛血清的DMEM培养液中原代培养，将细胞接种于6孔细胞培养板，采用随机数字表法分为4组(n＝10)：对照组(C组)正常培养24 h；缺氧复氧组(H/R组) 行缺氧2 h后复氧4 h；阴性对照转染组(con-siRNA组)和TLR4-siRNA组用siRNA、TLR4-siRNA转染，终浓度为80 nmol/L。于缺氧复氧损伤模型制备成功后，采用MTT法观察心肌细胞存活情况，采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率，采用RT-PCR法检测TLR4 mRNA的表达，采用Western blot法检测心肌细胞TLR4、Bcl-2、Bax及caspase-3的表达。
结果与C组比较，其余3组心肌细胞存活率降低，TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达上调，心肌细胞凋亡率升高，Bcl-2表达下调(P<0.01)；与H/R组和con-siRNA组比较，TLR4-siRNA组心肌细胞存活率升高，TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达下调，心肌细胞凋亡率降低，Bcl-2表达上调(P<0.01)。
结论Toll样受体4可通过下调Bcl-2表达，上调caspase-3及Bax表达，参与新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡的过程。