非融合rIL-24蛋白的制备及活性鉴定

来源 :中国生化药物杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kxy66

【摘要】

：

目的制备非融合的rIL-24蛋白，鉴定其体外诱导肿瘤细胞凋亡活性。方法为制备非融合IL-24蛋白，将IL-24基因插入到pET32a（＋）上Kpn Ⅰ与Barn H Ⅰ之间，构建表达载体IL-24／pET32a，IPTG诱导

【作者】

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杨珺张小贤张卫军邹全明

【机构】

：

浙江医学高等专科学校,第三军医大学生物制药教研室

【出处】

：

中国生化药物杂志

【发表日期】

：

2009年5期

【关键词】

：

rIL-24 非融合蛋白纯化诱导肿瘤细胞凋亡 rIL-24 non-fusion protein purification inducing tumor c

【基金项目】

：

国家高技术863计划资助课题（No.2001AA21516）

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目的制备非融合的rIL-24蛋白，鉴定其体外诱导肿瘤细胞凋亡活性。方法为制备非融合IL-24蛋白，将IL-24基因插入到pET32a（＋）上Kpn Ⅰ与Barn H Ⅰ之间，构建表达载体IL-24／pET32a，IPTG诱导在E．coli BL21（DE3）中表达。洗涤后的包涵体溶解在2mol／L尿素（pH9．0）中，采用镍离子亲和色谱和凝胶分子筛的二步法纯化，肠激酶酶切（肠激酶与蛋白1：400，pH7．5处理36h），再用亲和柱色谱纯化制备非融合的rIL-24。MTT法和形态学观察分析rIL-24体外诱

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