花色苷对高糖培养的视网膜Mueller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体表达的影响

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目的 观察花色苷对体外高糖培养的视网膜Meuller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响。方法取出生后10d的雄性Sprague—Dawley(SD)大鼠视网膜组织,体外原代培养Mueiler细胞。第2~4代细胞用于实验。将实验分为正常对照组(A组)、高糖对照组(B组)、高糖+30μmol/L花色苷组(C组)、高糖+60μmol/L花色苷组(D组)、高糖+100μmol/L花色苷组(E组)进行。采用噻唑蓝比色法(MTT)测定波长570nm处的吸光度[A,旧称光密度(OD)]值,以各组A值计算细胞相对存活率。采用免疫蛋白印迹法(Westernblot)检测各组大鼠视网膜MOiler细胞上GI。AST的蛋白表达。结果MTT检测显示,A、B、C、D、E组A值分别为0.4508±0.0204、0.2701±0.0314、0.3320±0.0232、0.4283±0.0172、0.3619±0.0270,细胞相对存活率分别为100.0%、59.9%、73.6%、95.0%、80.3%。其中,C、D、E组A值均较B组增高,差异有统计学意义(F=32.25,P〈0.05);D组A值较C、E组显著增高,差异也有统计学意义(F=21.07,P〈0.05)。Western blot检测显示,B组大鼠视网膜Mueller细胞的GI,AST蛋白表达较A组降低,差异有统计学意义(t=5.25,P〈0.05);A、C、D、E组间大鼠视网膜Mueller细胞的GI。AST蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义(F=2.979,P〉0.05)。结论花色苷可逆转高糖引起的Mueller细胞GLAST蛋白表达下降。

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