目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠杆菌与肺炎克雷伯菌在3～6岁健康儿童中的流行现状及耐药情况。方法收集兰州市某幼儿园粪便标本163份,通过细菌筛选鉴定,按照2015年CLSI推荐的标准进行药物敏感性试验和ESBLs表型确定。结果 163份粪便样本中共分离鉴定出225株细菌,其中产ESBLs的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌为51株和28株,检出率分别为22. 67%和12. 44%,2种菌检出率在性别、年龄上比较组间差异无统计学意义(P>0. 05)。产ESBLs的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌对环丙沙星、庆大霉素、美罗培南、哌拉西林、阿米卡星、呋喃妥因、磷霉素、替加环素等8种抗菌药物的耐药性检出率分别为56. 86%和17. 86%、54. 90%和53. 57%、5. 88%和17. 86%、88. 24%和53. 57%、27. 45%和57. 14%、19. 61%和57. 14%、13. 73%和57. 14%、7. 84%和21. 43%;产ESBLs的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌耐1～8种抗菌药物的比例分别为15. 19%、29. 11%、22. 78%、13. 92%、15. 19%、2. 53%、1. 27%、0。结论健康儿童粪便标本中存在产ESBLs的大肠杆菌与肺炎克雷伯菌,分别对哌拉西林和阿米卡星、呋喃妥因、磷霉素的耐药性较强。因此,对于健康儿童抗菌药物的使用需要引起广泛关注,并进行有效控制。