【摘 要】
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目的 观察外源性后肾间充质细胞(MMCs)对缺血再灌注(I/R)后急性.肾小管损伤的防护作用,并探讨其可能的机制.方法 取孕13 d大鼠胚胎分离培养后肾间充质细胞,采用5-溴脱氧尿嘧
【机 构】
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第三军医大学附属新桥医院肾内科全军肾脏病中心,重庆,400037解放军第一○七中心医院肾内科;
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目的 观察外源性后肾间充质细胞(MMCs)对缺血再灌注(I/R)后急性.肾小管损伤的防护作用,并探讨其可能的机制.方法 取孕13 d大鼠胚胎分离培养后肾间充质细胞,采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记.建立缺血再灌注急性肾小管损伤大鼠模型,SD大鼠随机分为MMCs组、I/R组和假手术对照组(sham),MMCs组大鼠在成功建立肾脏缺血再灌注损伤后,即经下腔静脉输注BrdU标记后的大鼠后肾间充质细胞,分别于术后24、48、72、96 h处死各组大鼠,自动生化仪检测血清尿素氮(BUN)及血清肌酐(Scr)水平,常规HE染色观察肾脏病理改变,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法观察凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax在肾脏表达,荧光显微镜观察标记的MMCs在肾组织中的定位分布.结果 MMCs组各时相点大鼠BUN、Scr水平均显著低于同时相点I/R组(均P＜0.05),TUNEL结果显示,术后48 h凋亡的肾小管上皮细胞数量MMCs组[(13.4±3.2)/HPF]明显少于同时相点I/R组[(25.4±5.2)/HPF](P＜0.05),免疫组化结果显示I/R组Bcl-2、Bax蛋白表达水平均高于sham组,48 h达高峰,MMCs组Bcl-2表达水平高于同时相点I/R组,而Bax表达水平则低于同时相点I/R组,Bcl-2/Bax比值明显升高(均P＜0.05).MMCs组术后72 h肾组织内可见BrdU阳性细胞[(60±6)/HP],术后96 h阳性细胞明显增多,为[(143±8)/HP].结论 外源性后肾间充质细胞能够迁移、定居于缺血再灌注损伤后的肾脏小管上皮,MMCs输注后可抑制肾小管上皮细胞凋亡、坏死及炎症细胞浸润,对缺血再灌注急性肾小管损伤具有防护作用.
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