大肠杆菌表达几丁质酶对不同底物的酶学性质及其降解产物分析

来源 :食品与发酵工业 | 被引量 : 0次 | 上传用户：suan11111

【摘要】

：

采用重组大肠杆菌大量表达几丁质酶LICHI18A,经Ni-NTA柱纯化后,对不同底物的酶学性质进行了研究,以Lineweaver-Burk双倒数作图法测定米氏常数,采用薄层色谱(TLC)和高效液相色

【作者】

：

吕梦圆石佳仙夏祥林建国蔡俊胡瑛

【机构】

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湖北工业大学轻工学部生物工程学院发酵工程教育部重点实验室/工业发酵湖北省协同创新中心

【出处】

：

食品与发酵工业

【发表日期】

：

2015年3期

【关键词】

：

几丁质酶大肠杆菌纯化酶学性质酶解产物

【基金项目】

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国家自然科学基金青年科学基金项目(31201425);人事部2011年度留学人员科技活动项目择优资助项目;2013年全国大学生创新创业训练计划项目(201210500030)

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采用重组大肠杆菌大量表达几丁质酶LICHI18A,经Ni-NTA柱纯化后,对不同底物的酶学性质进行了研究,以Lineweaver-Burk双倒数作图法测定米氏常数,采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对降解产物进行分析。结果表明,该几丁质酶分子量为54 k Da,对水溶性壳聚糖的Km和Vmax分别为4.04 mg/m L和222.2μmol/(min·mg);对水溶性壳聚糖的反应最适温度和p H分别为60℃和7.0;对胶体几丁质的Km和Vmax分别为2.913 mg/m L和2.83

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