【摘 要】
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目的·获取高纯度的大鼠α2巨球蛋白(Rα2M)，并对蛋白结晶进行筛选，以期获取高分辨率衍射数据，为后续结构生物学研究奠定基础。方法·将Rα2M基因克隆到真核表达载体pCE
【机 构】
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上海交通大学医学院细胞分化与凋亡教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(31170724)~~
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目的·获取高纯度的大鼠α2巨球蛋白(Rα2M)，并对蛋白结晶进行筛选，以期获取高分辨率衍射数据，为后续结构生物学研究奠定基础。方法·将Rα2M基因克隆到真核表达载体pCEP4中，使用PEI介导的瞬时转染方法在HEK293EBNA细胞中表达重组蛋白Rα2M。采用阴离子柱交换层析和镍柱亲和层析技术从表达培养基中提纯Rα2M，对纯化蛋白进行结晶筛选和优化。结果·经纯化后，得到相对分子质量约为180000的重组蛋白Rα2M的全长蛋白，以及被切割后的大片段和小片段。通过结晶筛选和优化后
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