构建pCool-GST-ICAD/CAD并在大肠杆菌中表达CAD核酸酶及活性研究

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackiesage
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目的:构建pCool-GST-ICAD/CAD的表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达具有生物学活性的CAD核酸酶。方法:用PCR扩增CAD核酸酶基因,将扩增产物克隆入pCool-GST-ICAD载体中构建出pCool-GST-ICAD/CAD表达质粒。经酶切和电泳鉴定正确后,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物经亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤等方法分离纯化,最后用SDS-PAGE和DNA降解实验进行鉴定。结果:构建了pCool-GST-1CAD/CAD原核表达质粒,重组载体转化后表
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