【摘 要】
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目的 通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能.方法与结果 首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物
【机 构】
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杭州师范大学实验动物科学实验室,江苏大学实验动物中心,山东省青岛第十七中学
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目的 通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能.方法与结果 首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接,构建表达载体pEF6/V5 His-Vill;经真核表达验证后,酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件;显微注射390枚受精卵后,在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性G0代小鼠19只,其中16只能够稳定遗传并建系,转基因阳性小鼠外观未有明显改变.结论 Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料.
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