【摘 要】
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目的：探讨归芪白术方联合奥沙利铂通过血管活性肠肽（VIP）/环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）信号通路调控下游水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白4（AQP4）从而保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。方法：将密度为1×10~7个/mL的胃癌细胞株MFC制成细胞悬液，经荷瘤小鼠右腋下接种细胞悬液0.2 mL，构建胃癌荷瘤小鼠模型，造模成功后将小鼠随机分为5组，模型组、奥沙利铂组(10mg·kg
【基金项目】
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甘肃省“双一流”科研重点项目（GSSYLXM-05）； 中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目（2019PT320005）； 甘肃省高效中（藏）药化学与质量研究重点实验室开放基金项目（zzy-2022-06）； 甘肃省中医药研究中心专项（zyzx-2020-zx1
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目的：探讨归芪白术方联合奥沙利铂通过血管活性肠肽（VIP）/环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）信号通路调控下游水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白4（AQP4）从而保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。方法：将密度为1×10~7个/mL的胃癌细胞株MFC制成细胞悬液，经荷瘤小鼠右腋下接种细胞悬液0.2 mL，构建胃癌荷瘤小鼠模型，造模成功后将小鼠随机分为5组，模型组、奥沙利铂组(10mg·kg-1)、奥沙利铂加归芪白术方高、中、低剂量组(17.68、8.84、4.42 g·kg-1)，每组10只，另外余10只作为空白组。各组小鼠经灌胃或腹腔注射中药、奥沙利铂或生理盐水，治疗14 d。末次给药后，次日眼球取血分离血清并取其结肠样本。苏木素-伊红（HE）染色观察组织形态的变化。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中D-乳酸（D-LA）、二胺氧化酶（DAO）含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测各组小鼠结肠组织中VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白的表达。结果：与正常组比较，模型组黏膜下层水肿，黏膜层中肠腺排列紊乱，杯状细胞缺失，可见大量炎性细胞浸润及绒毛脱落的现象。而各给药组均有不同程度的改善；与正常组比较，模型组血清中DAO和D-LA水平均显著上升（P＜0.01），与模型组比较，联合用药高剂量组DAO和D-LA水平及联合用药中剂量组D-LA水平均有所下降（P＜0.05,P＜0.01），与奥沙利铂组比较，联合用药高、中剂量组D-LA水平有所下降（P＜0.05），其余组DAO和D-LA表达水平也有所下降，但差异无统计学意义；与正常组比较，模型组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P＜0.05,P＜0.01）；与模型组比较，各给药组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平均有所升高，其中联合用药高剂量组VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P＜0.05,P＜0.01），联合用药中剂量组cAMP蛋白表达水平升高（P＜0.05）；与奥沙利铂组比较，联合用药高剂量组cAMP蛋白表达水平明显升高（P＜0.05），其余组mRNA及蛋白表达也有所升高，但差异无统计学意义。结论：归芪白术方联合奥沙利铂通过VIP/cAMP/PKA信号通路调节AQP3和AQP4达到保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。
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