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分析ADAM10对铜离子诱导后的PrP蛋白的剪切特点。
方法常规方法表达、纯化人PrP全长蛋白(aa 23-230),利用氯化铜对纯化后的PrP蛋白进行诱导。用不同浓度的ADAM10对PrP蛋白进行处理,检测诱导后全长蛋白及剪切片段的PK抗性。
结果重组人PrP蛋白经Cu2+诱导后具有部分抵抗PK消化的特点。Cu2+诱导后的PrP蛋白可被ADAM10剪切,具有剂量依赖性。ADAM10对Cu2+诱导的PrP蛋白处理后抵抗PK消化的能力明显加强。
结论ADAM10可以剪切Cu2+诱导的PrP蛋白,同时增加了处理后PrP蛋白的PK抗性。