应用核酸原位分子杂交法检测弓形虫SAG1抗原基因在免疫小鼠体内的表达

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PCR扩增RH株弓形虫抗原基因SAG1编码序列,构建pcDNA3-SAG1重组表达质粒。DNA免疫接种小鼠,3周后处死动物,取注射部位肌肉作冰冻切片,用原位分子杂交方法检测弓形虫pcDNA3-SAG1重组质粒在免疫小鼠肌肉内的表达。结果PCR扩增出SAG1编码区目的基因,片段大小为1 020bp。测序、酶切分析表明构建的pcDNA3-SAG1重组表达质粒含有扩增的基因。利用原位分子杂交在免疫接种pcDNA3-SAG1的小鼠骨骼肌中检测到紫蓝色的阳性杂交信号,提示局部肌肉有目的基因mRNA转录的发生。
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