【摘 要】
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目的:研究溶氧量对酿酒酵母S288C及工程菌ARO8-10的β-苯乙醇合成代谢的影响及调控效应.方法:在5L发酵罐中装液量60％,控制pH 5.0,温度30℃,通气比0.5～2.0 wm,定时取样检测发酵
【机 构】
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北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心北京市食品添加剂工程技术研究中心食品质量与安全北京实验室 北京100048;北京市食品添加剂工程技术研究中心食品质量与安全北京实验室 北京100048;
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目的:研究溶氧量对酿酒酵母S288C及工程菌ARO8-10的β-苯乙醇合成代谢的影响及调控效应.方法:在5L发酵罐中装液量60％,控制pH 5.0,温度30℃,通气比0.5～2.0 wm,定时取样检测发酵液生物量、β-苯乙醇、L-苯丙氨酸转化率以及菌体相关代谢酶活性等.结果:通气条件在0.5～2.0 vvm范围时,野生型菌株S288C的生物量、异柠檬酸脱氢酶(ICDH)酶活力明显高于转氨酶基因ARO8与脱羧酶基因ARO10耦合过表达工程菌ARO8-10;ARO8-10的β-苯乙醇发酵产量、L-苯丙氨酸转氨酶、苯丙酮酸脱羧酶、G6PD、GK及PDC酶活力均明显高于S288C(P≤0.01).在1.0 vvm通气条件发酵60 h时,ARO8-10的发酵液中葡萄糖已基本用尽,β-苯乙醇产量达到2.68 g/L,L-苯丙氨酸转化率达到47.3％,较S288C分别提高了44.4％和12.4％.1.0 wm为β-苯乙醇发酵较适宜的通气条件.结论:酿酒酵母的β-苯乙醇代谢与艾利希途径、莽草酸途径、EMP、PPP途径TCA循环等密切相关,构成其合成代谢网络,代谢途经多种酶相互影响;ARO8和ARO10基因耦合过表达,增强了L-苯丙氨酸氨基转移酶和苯丙酮脱羧酶活力,有利于提高G6PD、GK及PDC酶活力,β-苯乙醇代谢流量及产量.
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