【摘 要】
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利用相关生物信息学软件,对从人结肠组织克隆所得某一孤儿G蛋白偶联受体(orphn G protein-coupled receptors,oGPCRs)成员hGPCRc的氨基酸序列进行分析显示,hGPCRc对应的氨基
【机 构】
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四川农业大学玉米研究所,军事医学科学院放射医学研究所,海军总医院
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利用相关生物信息学软件,对从人结肠组织克隆所得某一孤儿G蛋白偶联受体(orphn G protein-coupled receptors,oGPCRs)成员hGPCRc的氨基酸序列进行分析显示,hGPCRc对应的氨基酸序列组成了七个跨膜区段的结构域,具备GPCR的结构特征;然后,将hGPCRc之cDNA与绿色荧光载体pEGFP-N1构建GFP-hGPCRc表达载体,以空白质粒pEGFP-N1作对照,转染CHO-K1细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察到空白质粒pEGFP-N1转染的细胞表达了GFP并均匀分布于整个细胞,而GFP-hGPCRc转染的细胞观察到荧光清晰聚集于细胞膜和各细胞器质膜上,因而hGPCRc蛋白定位于膜上并稳定表达,与软件分析结果相一致;最后,以RT-PCR检测hGPCRc在20周龄胎儿重要组织器官及部分成人组织中的表达情况,结果显示hGPCRc在人心、肾、小脑及结肠等组织均有表达,但在肝、大脑、小肠及肌肉等组织里未检测到表达.该表达谱对于进一步认识hGPCRc在胚胎发育中的作用及生理功能提供了线索.
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