【摘 要】
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目的: 探讨MAPK信号转导途径在结核杆菌抗原(Mtb- Ag)活化的γδT细胞杀伤肿瘤细胞中的作用。方法: 用Mtb- Ag刺激正常人PBMC以诱导γδT细胞扩增, 并用磁珠阳性分选法分离高
【机 构】
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蚌埠医学院免疫学教研室,蚌埠医学院免疫学教研室,蚌埠医学院免疫学教研室 安徽蚌埠233003,安徽蚌埠233003,安徽蚌埠233003
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目的: 探讨MAPK信号转导途径在结核杆菌抗原(Mtb- Ag)活化的γδT细胞杀伤肿瘤细胞中的作用。方法: 用Mtb- Ag刺激正常人PBMC以诱导γδT细胞扩增, 并用磁珠阳性分选法分离高纯度的γδT细胞; 用MTT比色法测定γδT细胞对肿瘤细胞系K562和Raji的细胞毒活性, 并观察MEK/Erk特异性抑制剂PD98059和p38 MAPK特异性抑制剂SB203580, 对细胞毒活性的阻断作用。用流式细胞仪检测肿瘤细胞诱导γδT细胞上CD69的表达, 并观察PD98059和SB203580对CD69表达的抑制作用。结果: 新鲜分离的PB- MC, 用Mtb Ag刺激培养第 10天, 用磁珠阳性法分离的细胞中γδT细胞的比率, 分别为 3. 56%、74. 63%和 98. 20%。PD98059可抑制γδT细胞的杀瘤活性, 且对γδT细胞杀伤Fas低表达的K562细胞的抑制率(39. 27% )高于对γδT细胞杀伤高表达Fas的Raji细胞的抑制率 ( 26. 58% )。PD98059还能明显抑制肿瘤细胞诱导γδT细胞表达CD69; 而SB203580对γδT细胞的杀瘤活性和肿瘤细胞诱导的CD69的表达均无影响。结论: MAPK途径中的Erk通路 (而不是p38通路 )参与了γδT细胞对肿瘤细胞细胞毒活性的启动, 且可能对γδT细胞的颗粒外吐作用较大, 而对Fas/FasL介导的细胞毒活性的作用较小。MAPK途径的Erk通路可能还参与肿瘤细胞诱导γδT细胞的?
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