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目的
探索Huh7肝癌细胞缺氧培养下分泌的外泌体对常氧Huh7肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。
方法通过差速超速离心提取缺氧条件下Huh7细胞分泌的缺氧外泌体，利用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析以及Western blot实验来鉴定缺氧外泌体。将缺氧外泌体与Huh7细胞在常氧下共培养后，分别采用CCK8、细胞划痕、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化。采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。
结果缺氧的Huh7细胞分泌的外泌体大小在30～150 nm之间，且表达有外泌体表面标志物CD9、CD63和TSG101。缺氧外泌体可显著增强常氧Huh7细胞的增殖（48 h：缺氧外泌体组与对照组A值分别为2.131±0.092与1.760±0.104，t = 3.740，P < 0.01；72 h:缺氧外泌体组与对照组A值分别为3.121±0.157与2.298±0.085，t = 8.289，P < 0.01）、迁移[24 h:缺氧外泌体组与对照组的迁移距离分别为(0.37±0.06）cm与（0.19±0.05）cm，t = 4.813，P < 0.05；48 h：缺氧外泌体组与对照组的迁移距离分别为（1.15±0.07）cm与（0.62±0.08）cm，t = 8.874，P < 0.05]及侵袭能力[缺氧外泌体组(123±18)个与对照组（44±12）个，t = 6.203，P < 0.01]。
结论缺氧环境下肝癌Huh7细胞分泌的外泌体可以促进Huh7细胞的增殖、迁移及侵袭，提示缺氧外泌体介导的细胞间信息传递可能是肝癌缺氧微环境中肿瘤细胞恶性程度增加的关键机制之一。