人源Cdc25C蛋白的融合表达及纯化

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lavina0526
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目的:表达并纯化有活性的GST—Cdc25C融合蛋白,以用于Cdc25C功能研究。方法:利用RT—PCR克隆MCF-7细胞的cdc25e全长基因;在大肠杆菌中表达GST—Cdc25C融合蛋白;利用GSH交联的琼脂糖珠纯化GST—Cdc25C融合蛋白;通过体外磷酸酶活性分析检测GST—Cdc25C融合蛋白的磷酸酶活性。结果:克隆获得1465bp的人源cdc25c全长基因,并克隆至pGEX-4T-1原核表达载体;在原核系统中可溶性表达了相对分子质量约87x10。的GST—Cdc25C融合蛋白;通过亲和纯化获得
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