【摘 要】
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目的研究RNA干扰技术沉默Arp2/3复合物后对胶质瘤细胞片状伪足以及运动能力的影响。方法脂质体介导Arp3-siRNA转染体外常规培养的U251胶质瘤细胞,同时设siRNA-NC(阴性对照组,
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目的研究RNA干扰技术沉默Arp2/3复合物后对胶质瘤细胞片状伪足以及运动能力的影响。方法脂质体介导Arp3-siRNA转染体外常规培养的U251胶质瘤细胞,同时设siRNA-NC(阴性对照组,n=3)组和siR-NA-N(空白对照组,n=3)组。RT-PCR和western blot方法验证三组中Arp3 mRNA和蛋白的表达情况。免疫荧光检测不同处理组的Arp2/3复合物定位以及细胞形态变化。Transwell细胞侵袭实验和划痕实验检测三组细胞的运动能力。结果三组细胞的Arp3 mRNA相对表达水平分别为:19.33%±2.08%、97.33%±2.38%和96.67%±2.52%(P<0.01);三组细胞蛋白相对表达量分别为20.00%±3.00%、85.33%±3.21%和84.33%±4.04%(P<0.01)。与siRNA-N组比较,siRNA-Arp3组胶质瘤细胞Arp3 mRNA和蛋白的表达水平下调分别达80%和76%。免疫荧光结果显示siRNA-Arp3组细胞较siRNA-NC组和siRNA-N组细胞片状伪足明显变小甚至消失。Transwell细胞侵袭实验和划痕实验显示siRNA-Arp3组胶质瘤细胞运动能力较siRNA-N组分别下降达69%(P<0.01)和68%(P<0.01)。结论 Arp2/3复合物通过影响片状伪足的形成,从而在胶质瘤细胞的运动过程中发挥重要作用,提示Arp2/3复合物可作为治疗脑胶质瘤的一个候选靶点。
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