观察Notch信号通路在肺癌干细胞中的表达及阻断Notch信号通路对肺癌干细胞增殖的影响。

以CD133作为肿瘤干细胞表面标志,采用流式细胞仪高速分选技术从人肺腺癌细胞株A549中分离肺癌干细胞及普通肿瘤细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及Western blot检测肺癌干细胞和普通肿瘤细胞内的Notch信号通路的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外增殖能力,并绘制生长曲线;使用γ-分泌酶抑制剂(DAPT)阻断Notch信号通路传导,观察肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外生长差异。

流式分选前检测CD133阳性细胞(肺癌干细胞)占所有A549细胞的百分比为(0.40±0.11)%,而流式分选后所得细胞中,CD133阳性细胞占百分比为(95.00±0.63)%,两者差异有统计学意义(P< 0.01)。Notch通路在肺癌干细胞及普通肿瘤细胞中均表达,Notch1及Notch2在肺癌干细胞中的表达显著低于在普通肿瘤细胞内的表达,差异有统计学意义(P< 0.05);Hes1仅在普通肿瘤细胞中表达,在肺癌干细胞中未检测到表达。肺癌干细胞与普通肿瘤细胞的增殖能力差异无统计学意义(P> 0.05),而在DAPT干预48 h后,肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外增殖均受到了抑制,肺癌干细胞的生长抑制率[(33.7±1.9)%]显著高于普通肿瘤细胞的生长抑制率[(21.5±3.4)%],差异有统计学意义(P< 0.05)。

较之普通肿瘤细胞,阻断Notch通路传导对肺癌干细胞的生长抑制效果更强,这可能与DAPT抑制了Notch的过高表达对肺癌细胞的负反馈作用有关。