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目的
构建高尔基体糖蛋白73(GP73)的液态芯片检测体系并评价其检测性能。
方法制备并纯化5株抗GP73的单克隆抗体，采用酶联免疫吸附试验双抗夹心法进行抗体配对筛选。应用筛选到的抗体对构建Luminex液态芯片检测体系，并对该检测体系进行分析性能评估。应用该体系检测正常对照、慢性乙型肝炎和肝细胞癌血液样本各30例，比较3组间GP73浓度的差异。
结果制备并纯化了5株抗GP73单克隆抗体，配对筛选成功5对。应用8F10D1和10B9F11抗体对成功构建了GP73的Luminex液态芯片检测体系。该检测体系的灵敏度为0.25 ng/ml，线性检测范围为0.25～100 ng/ml，特异度较好，批内精密度<8%，批间精密度<9%，回收率为83%～92%，线性稀释效应的线性回归方程为y＝1.141x＋6.436(r2＝0.998 4，P<0.001)。正常对照组、慢性乙肝组和肝细胞癌组血液样本的GP73浓度分别为42.8(38.68，55.90)ng/ml、61.49(43.59，81)ng/ml和122.78(49.36l，264.55)ng/ml。肝细胞癌组的GP73浓度高于慢性乙肝组和正常对照组(均P<0.05)，慢性乙肝组的GP73浓度高于正常对照组(P<0.05)。
结论成功构建了GP73的液态芯片检测体系，为GP73检测在临床上的应用奠定了基础。