探讨IL－17对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)和侵袭迁移的影响及其可能作用机制。
方法(1)取对数生长期的胃癌细胞株MGC－803，分别运用浓度为0、1 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL、1 μg/mL IL－17干预48 h，观察细胞形态学变化。取细胞形态变化最为明显的浓度作为后续实验最适浓度。浓度为100 ng/mL的IL－17干预胃癌细胞48h，设为实验组；加入等量PBS干预胃癌细胞48 h，设为对照组。(2)RT－PCR检测两组胃癌细胞中钙粘附蛋白E(E－cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的RNA表达水平。(3)Western blot检测两组胃癌细胞中E－cadherin和Vimentin的相对蛋白表达量。(4)划痕实验和Transwell实验检测两组胃癌细胞的侵袭和迁移能力。正态分布的计量资料采用
±s表示，两组比较采用t检验。
(1)胃癌细胞EMT形态变化：不同浓度IL－17处理MGC－803胃癌细胞48 h后，细胞形态发生显著改变。主要是细胞由多角紧密连接状态逐渐向连接松散，梭形形态转变，细胞粘附能力明显下降，且随着IL－17浓度从0增加至100 ng/mL时，细胞形态改变逐渐明显；当浓度达到100 ng/mL时，细胞形态改变最明显；但当IL－17浓度继续增加至1 μg/mL时，细胞形态改变不再显著，部分细胞出现死亡，漂浮现象。(2)RT－PCR检测结果：实验组和对照组胃癌细胞中E－cadherin mRNA相对表达量分别为0.45±0.13和1.06±0.23；Vimentin mRNA相对表达量分别为2.39±0.55和1.23±0.41，上述指标两组比较，差异均有统计学意义(t＝3.811，2.923，P<0.05)。(3)Western blot检测结果：实验组和对照组胃癌细胞中E－cadherin蛋白相对表达量分别为0.86±0.17和1.56±0.29；Vimentin蛋白相对表达量分别为1.01±0.12和0.56±0.17，上述指标两组比较，差异均有统计学意义(t＝3.551，3.601，P<0.05)。(4)划痕实验结果显示：划痕36 h后，实验组和对照组胃癌细胞均发生了迁移，其划痕宽度分别为(0.76±0.13)mm和(0.40±0.15)mm，两组比较，差异有统计学意义(t＝3.095，P<0.05)。Transwell法检测结果显示：实验组和对照组穿膜细胞数计数为(159±28)个和(94±18)个，两组比较，差异有统计学意义(t＝3.307，P<0.05)。
结论IL－17通过促进胃癌细胞发生EMT转变，进而增强胃癌细胞迁移侵袭能力。