【摘 要】
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目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化过程中的作用
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81271282,81400967);重庆市杰出青年科学基金(CSTC2012JJJQ10003)~~
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目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化过程中的作用及可能机制。方法用组织贴块法体外培养原代VSMCs;用氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)(50μg/m L)刺激VSMCs构建泡沫细胞模型,分为空白对照组及24、48、72 h组4组以检测VSMCs泡沫化过程中PPARδ的表达变化;利用PPARδ激动剂(GW0742,25 nmol/L)和抑制剂(GSK0660,1μmol/L)调控PPARδ并分为空白对照组、ox-LDL(50μg/m L)组、GW0742+ox-LDL(50μg/m L)组、GSK0660+ox-LDL(50μg/m L)组4组,刺激48 h;油红O染色及酶标仪测细胞内萃取油红光密度值检测细胞内脂质沉积;Western blot检测VSMCs中PPARδ、ACAT1蛋白表达情况以探索PPARδ在VSMCs泡沫细胞中的作用以及PPARδ和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(A-cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)的关系。结果 ox-LDL刺激下PPARδ的蛋白水平呈时间依赖地降低,其中48 h最低,下降约29%(P<0.05),随后维持在低水平表达;GW0742激动PPARδ后可明显减少VSMCs内总胆固醇含量约55%(P<0.05),而GSK0660则明显增加细胞内总胆固醇含量约20%(P<0.05);同时,GW0742可使ACAT1的蛋白表达量下降了约28%(P<0.05),而GSK0660则升高ACAT1的蛋白表达量约29%(P<0.05)。结论 PPARδ的激活可通过下调ACAT1表达抑制血管平滑肌源性泡沫细胞的形成。
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