猪圆环病毒2型 ORF4基因的原核表达及多克隆抗体的制备

来源 :浙江农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kakayang

【摘要】

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猪圆环病毒2型（PCV2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原，ORF4是PCV2中继ORF1，ORF2，ORF3之后的第四大开放阅读框。本研究以提取的PCV2基因组为模板经PCR扩增获得ORF4基

【作者】

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王净修高章照姜永厚吴海港饶品彬全滟平徐辉

【机构】

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浙江理工大学生命科学学院,浙江省动物疫病预防控制中心

【出处】

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浙江农业学报

【发表日期】

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2014年1期

【关键词】

：

猪圆环病毒2型 ORF4 原核表达多克隆抗体 porcine circovirus type 2 ORF4 prokaryotic expression po

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（31101831）, 浙江省自然科学基金（Y3090166）

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猪圆环病毒2型（PCV2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原，ORF4是PCV2中继ORF1，ORF2，ORF3之后的第四大开放阅读框。本研究以提取的PCV2基因组为模板经PCR扩增获得ORF4基因（386～565 nt），并克隆到pGEX-4T-1表达载体上，构建pGEX -4T-ORF4表达载体。经PCR和测序鉴定后，将重组质粒转化受体菌BL21诱导表达并进行目的蛋白GST-ORF4纯化，然后用纯化的蛋白免疫新西兰兔，在免疫期间采血并用间接ELISA对多抗血清进行效价测定。 SDS-

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