nodosin促进大鼠部分肝移植肝细胞再生的实验研究

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目的探讨溪黄草有效成分nodosin对大鼠减体积肝移植术后肝细胞再生的影响。方法以Wistar大鼠作为供体,SD大鼠作为受体,采用改良的二袖套法建立大鼠部分肝移植模型,将24只受体大鼠随机分为nodosin组和对照组。nodosin组于肝移植术后经尾静脉注射nodosin 100μg/ml。在术后3 d和7 d分别处死大鼠取外周血浆及肝脏组织标本。分光光度法检测外周血浆中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和白蛋白(ALB)含量;光学显微镜下观察肝组织形态学改变;采用免疫组织化学法检测肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)抗体的表达水平;采用蛋白印迹法(Western blot)检测肝组织中磷酸化蛋白激酶(p-AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)、细胞周期素D1(cyclin D1)、血红素加氧酶(HO)-1蛋白的表达水平;采用磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法)和d UTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肝细胞的凋亡情况。结果术后3 d和7 d,与对照组比较,nodosin组大鼠血清中ALT、AST含量较低,ALB含量较高(均为P<0.05),同时nodosin能够减轻大鼠肝移植术后肝组织病理损伤。nodosin组的PCNA阳性表达细胞数明显多于对照组(P<0.05)。nodosin组增殖相关蛋白p-AKT、p-m TOR、cyclin D1和HO-1蛋白表达水平均明显高于对照组(均为P<0.05)。nodosin组发生凋亡的肝细胞数量和比例明显低于对照组(P<0.05)。结论大鼠肝移植术后应用nodosin具有减少肝细胞凋亡数量,促进肝细胞增殖的作用。
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