【摘 要】
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目的探讨膜-细胞骨架联接蛋白Ezrin对胃癌细胞株AGS侵袭和迁移能力的影响。方法针对人Villin2基因(Ezrin编码基因)设计发夹式RNA(shRNA)。合成后克隆入载体pGCsilencer,扩增
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军消化病研究所,
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目的探讨膜-细胞骨架联接蛋白Ezrin对胃癌细胞株AGS侵袭和迁移能力的影响。方法针对人Villin2基因(Ezrin编码基因)设计发夹式RNA(shRNA)。合成后克隆入载体pGCsilencer,扩增并中量提取质粒,应用脂质体Lipofectamine2000转染进AGS细胞。采用RT-PCR和Western印迹检测Ezrin的表达。shRNA转染AGS细胞并行G418筛选,传代扩增。结果shRNA-Ezrin对Ezrin表达抑制作用明显,稳定转染细胞Ezrin下调率达93%。侵袭实验AGSEzrin细胞的跨膜数为(27.67±4.50),与对照组(125.50±8.33)比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论Ezrin在人胃癌细胞侵袭迁移过程中发挥重要作用,可能成为胃癌基因治疗的一个新靶点。
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