【摘 要】
：
选用甲型流感H3N2亚型的代表株作为研究对象,基于对H3蛋白二级结构的分析预测和密码子使用频率曲线,对其基因序列进行了科学的密码子优化设计.以密码子优化的力度与局部二级结构混乱度成反比为原则,兼顾表达效率和正确的结构与功能,将优化后的H3序列克隆至表达载体pPICZα,电转入毕赤酵母系统中.经甲醇诱导使H3蛋白在毕赤酵母中高效分泌表达,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定其表达,同时筛选高拷贝菌株.最后对该菌株培养发酵,30℃甲醇诱导72 h后收集发酵的
【机 构】
：
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237
论文部分内容阅读
选用甲型流感H3N2亚型的代表株作为研究对象,基于对H3蛋白二级结构的分析预测和密码子使用频率曲线,对其基因序列进行了科学的密码子优化设计.以密码子优化的力度与局部二级结构混乱度成反比为原则,兼顾表达效率和正确的结构与功能,将优化后的H3序列克隆至表达载体pPICZα,电转入毕赤酵母系统中.经甲醇诱导使H3蛋白在毕赤酵母中高效分泌表达,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定其表达,同时筛选高拷贝菌株.最后对该菌株培养发酵,30℃甲醇诱导72 h后收集发酵的上清液,采用10 kD膜包过滤对其浓缩,经钴柱亲和层析等手段得到了H3蛋白的单一条带,并通过Western blot确认.纯化获得的H3抗原溶液本身不表现出血凝活性,但是与镍柱填料结合富集后表现出一定程度的血凝活性.本研究为流感病毒H3抗原在毕赤酵母系统中的重组表达和后续疫苗研发提供了基础.
其他文献
2018年4月30日,港交所发布新规,允许“同股不同权”的公司在主板上市。2020年1月20日,科创板迎来了首只同股不同权的股票--优刻得。2020年8月26日,深圳经济特区建立40周年之日,深圳表决通过7项创新性重要法规,其中一大亮点就是,在深圳注册的科技企业可实施“同股不同权”。
[摘 要]思政课专题式教学是提升思政课教学思想性、理论性、亲和力和针对性的有力方式。本文从课程统整理论视域下探讨思政课中专题式教学设计存在的问题和如何改进思政课专题式教学。 [关键词]课程统整;高职高专院校;思政课;专题式教學 [中图分类号] G641 [文献标志码] A [文章编号] 1008-2549（2021） 10-0097-03 学术界普遍认为，
实在智能是一家人工智能科技公司,聚焦AI+RPA赛道,打造各类智能软件机器人,即“章鱼·数字员工”.公司为金融、运营商、能源、交通、电商等领域企业和政府提供数字化转型(智能化+自动化)解决方案.对于80％以上的计算机各类应用软件操作场景,“章鱼·数字员工”可替代人工.
摘 要：悬臂浇筑法施工从20世纪60年代由前西德首先使用以来,发展至今,已成为修建大中跨径桥梁的一种有效施工手段。悬臂浇筑法是连续梁桥施工中常用的一种施工方法,在施工中使用挂篮作为移动模架,混凝土的灌注、钢筋的绑扎、预应力筋的张拉等工作全部在挂篮内实施。文章对挂篮施工理论进行了分析, 挂篮拼装以桁架式（贝雷梁桁架）挂篮为例对挂篮在桥梁工程中的应用进行了研究。 关键词：悬臂浇筑、挂篮施工、贝雷梁桁
黄芩苷(baicalin)是由黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)根部分离而来的黄酮类物质,为黄芩的主要活性成分.黄芩苷药理作用广泛,具有良好的抗炎效果,其主要机制包括调节肠道菌群、抑制核因子κB(NF-κB)核转位、增加相关microRNA的表达、抑制自噬、调节Treg/Th17平衡等.现综述黄芩苷抗炎症作用机制的最新研究进展,为其深入研究及在临床上的应用提供依据.
利用驯化获得的拟康宁木霉菌(Trichoderma koningii)处理甲基橙废水,以脱色率为指标探讨了反应时间、初始甲基橙浓度、pH、葡萄糖用量、不同培养时间等培养因素对拟康宁木霉生长前期降解甲基橙废水效果的影响;在较优条件下以脱色率为指标,探讨了酶在pH、温度、酶液投加量、初始甲基橙浓度、反应时间等条件下的酶促降解反应;并通过正交试验验证其脱色降解甲基橙染料的最佳反应条件,为染料废水的处理提供试验基础.试验表明,培养过程中拟康宁木霉菌降解甲基橙废水的最适条件为初始甲基橙浓度30 mg/L,培养时间7
高校课程思政是将高校专业课程教学与思政内容进行有机融合,寓价值观引导于知识传授和能力培养之中,并贯穿整个课程教学过程,实现全程育人、全方位育人.本文以“光学系统设计”课程为例,深入挖掘课程内容本身蕴含的思政元素,从教学目标、教学设计和思政实施过程等方面对高校专业课程教学与思政融合的路径进行了初步的探索,围绕课程建设、课堂教学和课程思政效果评价提出建议,以期进一步完善课程思政建设,落实立德树人根本任务.
教师特征的研究表明:学生喜欢或学生心目中理想的教师不仅仅要具有丰富的知识、高超的能力,更要有独特的人格.教师的人格不仅影响着学生的学业表现和心理发展,而且影响着教师的职业发展和心理健康.但目前一些教师的人格现状堪忧,而教师教育体系中缺少明确的举措.因此,教师教育在重视教师知识掌握和能力提高的同时,也要重视教师人格的培养,将具有良好人格作为教师教育的重要目标.通过开设和开展教师人格培养课程和活动、优化校园文化环境、加强自我教育等途径促进教师理想人格的形成与发展.
为了探究共激活因子相关的精氨酸甲基转移酶1(CARM1)在乳腺癌细胞中的生物学作用,构建了四环素诱导过表达CARM1的乳腺癌MDA-MB-231细胞株,并应用蛋白质印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)对相关指标进行检测.结果发现,在乳腺癌细胞株中成功诱导CARM1过表达之后,CARM1蛋白水平和mRNA水平均显著升高.此外,利用细胞划痕、平板克隆、细胞增殖试验、流式细胞术等试验方法检测过表达CARM1对细胞迁移、增殖、克隆形成以及细胞周期进程的影响.试验结果显示,
[摘 要]面对突如其来的新冠疫情，近半年来，各高校音乐学科纷纷采用多样化的网络教学模式，不仅体现了停课不停学的教学理念，同时我们也从中总结、归纳出更为先进的教学方式方法，在今后的教学中，如何尽可能发挥线上教学实践的优势、如何将线上教学与线下教学相融合是重点研究问题，开展音乐专业混合式教学是本文探讨的重点，旨在让高校音乐混合式教学得到更全面发展。 [关键词]音乐;混合式教学 [中图分类