pcDNA3．1（＋）／hFasL真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：usrrmhta

【摘要】

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目的：构建pcDNA3．1（＋）／hFasL真核表达载体并在COS-7细胞中进行瞬时表达。方法：经XbaⅠ酶切pBluescriptⅡKS（＋）／hFasL得到hFasLcDNA全长序列，将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋）。重组质

【作者】

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李秀娟刘纯张徽随华

【机构】

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重庆医科大学附属第一医院内分泌科,重庆医科大学病理学教研室

【出处】

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重庆医科大学学报

【发表日期】

：

2006年6期

【关键词】

：

FASL 真核表达 COS-7细胞质粒 FasL Eukaryotic expression COS-7 cell Plasmid

【基金项目】

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重庆市卫生局重点科研项目（01-1-104）,2004年重庆医科大学附属第一医院回国人员院内课题启动基金.致谢：感谢日本Kanazawa大学Takashi Suda教授提供pBluescriptⅡKS（＋）/hFasL质粒,而使试验得以顺利完成.

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目的：构建pcDNA3．1（＋）／hFasL真核表达载体并在COS-7细胞中进行瞬时表达。方法：经XbaⅠ酶切pBluescriptⅡKS（＋）／hFasL得到hFasLcDNA全长序列，将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋）。重组质粒pcDNA3．1（＋）／hFasL经过酶切和测序鉴定；阳离子脂质体法转染COS-7细胞并经免疫细胞化学染色检测重组体的表达。结果：重构质粒经限制性核酸内切酶XbaⅠ、DraⅡ、HindⅢ酶切以及序列分析鉴定，表明真核表达载体构建正确；以脂质体法转染COS-7细胞

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