目的：探讨血型血清学检测在ABO型新生儿溶血病诊断中应用价值，为临床诊断此类疾病提供更多的诊断依据。方法：选取2021年2月至2022年2月本院收治的100例疑似ABO型溶血病患儿为研究对象，对其进行新生儿血型检测、溶血三项检测。对检验结果（（1）直接抗球蛋白试验阳性与释放试验阳性；（2）释放试验阳性；（3）直接抗人球蛋白试验阳性与游离抗体试验阳性；（4）释放试验阳性和游离抗体试验阳性；（5）三项检验均为阳性。）进行分析，对比不同血型、年龄、性别对疾病发病的影响。结果：100例观察对象中有62例患儿最终被证实罹患ABO型新生儿溶血病，占比为62.00%。满足第（1）组阳性条件的阳性患儿10例，占比16.13%；满足第（2）组阳性条件的21例，占比33.87%；满足第（3）组阳性条件的8例，占比12.90%；满足第（4）组阳性条件的14例，占比22.58%；满足第（5）组阳性条件的9例，占比14.52%。其中，新生儿为A型有40例，占比为64.52%;B型有22例，占比为35.48%;A型新生儿数量显著多于B型（P＜0.05）。大部分患儿发病集中在年龄＜7 d，在7 d之后发病率显著降低。不同性别患儿的发病情况对比差异不显著（P＞0.05）。结论：血型血清学检验能为ABO新生儿溶血病的早期诊断提供重要诊断依据，对及早发现疾病并予以治疗有极高价值。另外本研究发现新生儿A型、年龄＜7 d的ABO型新生儿溶血病检出率更高，应引起相应的重视。