褪黑激素ELISA方法的建立

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将褪黑激素(MLT)与牛血清白蛋白(BSA)连结的复合物(MLT:BSA=12:1)免疫5只雄性新西兰大耳兔,收集高效价血清,并提纯抗体.在96孔微量反应板上,以1:10000的抗体包被,将MLT与酶标MLT先后加入到板中竞争结合抗体,制定标准曲线,建立了MLT酶联免疫测定法(MLT-ELISA).此方法灵敏度为17.31pg,板内变异系数8.1%,板间变异系数15.4%.用建立的此法测定夏至时考力代羊昼夜血样,测定结果跟国外报道的基本一致;用放射免疫法检测同一批血样,也获得类似结果,从而表明此方法可信.
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