耐辐射球菌PprI蛋白质表达及其纯化的实验研究

来源 :辐射研究与辐射工艺学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gdutzxp

【摘要】

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为了在大肠杆菌中高效表达耐辐射球菌PprI融合蛋白并进行纯化,本研究以PCMV-HA-pprI质粒为模板,PCR扩增pprI基因全序列,经Nco I和EcoR I双酶切后定向克隆到pET-28a表达载体中

【作者】

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张永芹周辉陈洁杨占山

【机构】

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苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院

【出处】

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辐射研究与辐射工艺学报

【发表日期】

：

2011年2期

【关键词】

：

耐辐射球菌 pprI基因原核表达质粒蛋白表达纯化 D.radiodurans R1 PprI gene Prokaryotic recombinant

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为了在大肠杆菌中高效表达耐辐射球菌PprI融合蛋白并进行纯化,本研究以PCMV-HA-pprI质粒为模板,PCR扩增pprI基因全序列,经Nco I和EcoR I双酶切后定向克隆到pET-28a表达载体中,构建重组原核表达质粒pET-28a-His-pprI,并转入E.coli BL21（DE3）RP。IPTG诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。对蛋白表达优化诱导时菌液的A600值、IPTG浓度、诱导时间和温度表达条件。诱导表达的PprI融合蛋白采用Ni-NTA Hi

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