【摘 要】
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目的 探讨不同浓度雌激素对人类脂肪组织来源干细胞生长增殖以及定向分化成脂肪细胞的影响.方法 对3例患者行脂肪抽吸术,并进行脂肪组织来源干细胞的分离培养及传代,利用流式
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目的 探讨不同浓度雌激素对人类脂肪组织来源干细胞生长增殖以及定向分化成脂肪细胞的影响.方法 对3例患者行脂肪抽吸术,并进行脂肪组织来源干细胞的分离培养及传代,利用流式细胞仪技术对细胞表面标志物进行鉴定,采用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法测定不同浓度的雌激素对脂肪组织来源干细胞生长增殖的影响,将第3代的脂肪组织来源干细胞分为单纯培养组、单纯成脂诱导组,雌激素不同浓度1×10-6 M、1×10-8 M、1×10-10 M处理成脂诱导组,分别定向诱导分化14d后,经油红O染色,通过RT-PCR方法分析产物中LPL和PPAR-γ2基因的表达情况.结果 流式细胞仪对其表面标志物进行检测,CD29、CD105和CD44阳性,CD31和CD34阴性,排除其为造血干细胞可能; 通过CCK-8法检测雌激素为1×10-8 M时可以明显促进干细胞的生长增殖,并能促进脂肪组织来源干细胞向脂肪细胞分化,RT-PCR检测雌激素处理组较单纯诱导组脂肪细胞特异性表达基因LPL及PPAR-γ2 表达强烈.结论 雌激素在浓度为1×10-8 M时可以明显促进脂肪组织来源干细胞生长增殖及向脂肪细胞的定向分化,为雌激素辅助干细胞在组织工程上的应用提供理论和实验依据.
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