大黄鱼(Larimichthys crocea)fAFLP方法的建立

来源 :集美大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:ldd3663
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以大黄鱼为材料,探索及优化了影响荧光标记AFLP(fAFLP)分析体系的主要因素.结果表明:内切酶EcoRI与MseI各0.35U,双酶切350ng大黄鱼基因组DNA,依次反应4h可得最佳效果;T4DNA连接酶2.5U,16℃过夜连接3止酶切产物与接头时效果最佳;以1μL连接产物作底物,EcoRI与MseI预扩引物分别为0.3μmol/L与1.5μmol/L时预扩效果最佳;预扩产物稀释超过100倍作为选择性扩增的模板时致使某些样品的电泳条带缺失.使用该体系分析了一个野生大黄鱼群体的AFLP片段的多态水平,
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