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中图分类号:R187+.1
文献标识码: A
文章编号: 1672-3783(2008)-9-0033-02
【摘 要】目的 采用悬液定量杀菌试验方法,对某种复方过氧化氢消毒剂杀菌效果进行了试验观察。结果 含30 g/L过氧化氢的该复方消毒剂,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用5 min,平均杀灭对数值均> 5. 0。用含30 g/L过氧化氢的该消毒剂进行擦拭消毒10 min,对染于桌面上的大肠杆菌降低对数值> 3. 00。结论 该复方过氧化氢消毒剂具有良好杀菌作用。
【关键词】过氧化氢;消毒剂;大肠杆菌;金黄色葡萄球菌
Observation on Disinfection performance
of A certain Compound Hydrogen Peroxide Disinfectant
ZHOU Rui-xin
Chengdu Jinjiang Center of Disease Prevention
and Control, Chengdu 610021, Sichuan,China
【Abstract】In order to know the disinfection p roperty of a compound hydrogen peroxide disinfectant, suspension quantita tive germicidal test was used to carry out experimental observation on its germicidal efficacy. Results The average reduction factor ( log10 ) of S taphy lococcus au reus and Escherich ia coli exposed to the compound disinfectant containing hydrogen peroxide 30 g/L for 5 min was 5. 0. Wiping disinfection with the disinfectant containing hydrogen peroxide 30 g/L for 10 min reduced Escherich ia coli on table surface by a logarithm of > 3. 00.Conclusions The compound hydrogen peroxide disinfectant had good germicidal efficacy.
【Key words】Hydrogen peroxide;Disinfectant ; Escherichia coli; S taphy lococcus aureus
过氧化氢( Hydrogen peroxide) 简称H2O2,无色透明液体,属较强氧化剂。杀菌机理主要是形成氧化能力很强的自由羟基,活性衍生物等,破坏微生物的通透性屏障并破坏细菌酶、氨基酸、蛋白质和DNA。过氧化氢优点是使用前不需活化,操作简便,为氧化剂,有利于有机物的去除;无异味,对血液或组织无固定作用。缺点对金属物品有腐蚀性,对橡胶有一定的加速老化的作用,对眼睛有刺激性等。其杀菌作用早在100多年前就已证实,但在消毒领域未引起足够重视。
七十年代以后,新消毒剂较少出现,而H2O2却解决了浓度提高与稳定性问题,由之近年来对其在消毒方面的研究和应用逐渐增多。近些年来,许多研究者对过氧化氢杀灭微生物的效果、消毒机理、增效和稳定方法进行了重新研究,尤其是对协同杀菌作用的研究。与此同时化学消毒剂的复配已成为一个重要的研究方向,这些复方消毒剂单用时的缺点已得到克服,并增加了杀菌灭毒的作用,非常实用。如单使用2000mg/L过氧乙酸有效杀灭脊髓灰质炎病毒I型需5min,而将与80%乙醇混合液使用1min即可达到相同效果。大量实验证明经改进过的复方过氧化氢消毒剂具有较强的杀菌作用。
本试验所用复方过氧化氢消毒剂是一种以硝酸银鳌合物与过氧化氢复配的消毒剂, 含过氧化氢300g/L,为无色透明溶液, pH为1.55。对该复方过氧化氢消毒剂的消毒相关性能,进行了实验室杀菌试验,结果如下。
1 方法
1.1 稳定性试验 将复方过氧化氢消毒剂原液装入密闭的聚乙烯塑料瓶内密封,置54℃恒温箱内储存14 d。于放置前、后分别取样,采用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢含量,计算下降率。
1.2 菌悬液制备 试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC 6538) ,大肠杆菌(8099)。取试验菌营养琼脂培养基斜面新鲜培养物,用5 ml稀释液洗下菌苔,经电动混合器混合20 s,使细菌悬浮均匀,用稀释液配制成试验菌悬液。
1.3 中和剂鉴定试验 试验以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为代表,设平行6组,按悬液定量杀菌试验程序进行。①消毒剂+菌片; ② (消毒剂+菌片) +中和剂;③中和剂+菌片; ④ (消毒剂+中和剂) +菌片; ⑤稀释液+菌片(正常菌对照) ; ⑥稀释液+中和剂+培养基作为阴性对照。试验结果,以第1组不长菌或仅有极少数菌落生长;第2组有菌落生长,较第1组为多,但较第3、4、5组为少;第3、4、5组组间菌落数误差率不超过15%;第6组无菌生长。表明所选中和剂及其浓度适宜。
1.4 悬液定量杀菌试验 在20℃水浴条件下,无菌试管内加入0.5 ml菌悬液与0.5ml有机干扰物(30 g/L牛血清白蛋白) ,混匀;然后加入1.25倍试验浓度的消毒剂4.0 ml,混匀(阳性对照为稀释液) 。作用预定时间,分别吸取0.5 ml样液加入到含4.5 ml中和剂试管内混匀,中和作用10 min。取样液,进行活菌计数培养,计算杀灭对数值。重复3次试验。
1.5 模拟现场消毒试验 选择木质桌面作为试验对象,确定染菌面积为5 cm ×5 cm,取相邻位置4块。取大肠杆菌悬液在选定的面积上进行涂抹染菌,自然晾干。用含30 g/L过氧化氢的复方消毒剂,进行喷雾消毒,每块面积上喷雾1 ml,作用10 min。用沾有含中和剂的采样液对消毒后面积上作涂抹法采样,然后将采样棉拭头置于含中和剂试管内;用同样方法对未经消毒处理的面积上进行采样,作为阳性对照;然后对试验组和对照组进行活菌计数培养,计数细菌总数,计算消毒后细菌减少对数值。重复30个样本。
2 结果
2.1 稳定性实验结果 经观察,该复方过氧化氢消毒剂储存前测定过氧化氢平均含量为298.7 g/L;密封包装于54℃存放14 d后,过氧化氢平均含量为282.2 g/L,平均下降率为5.52%。
2.2 中和剂鉴定试验结果 试验表明,用10 g/L硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲液作为中和剂,符合设计6组长菌数的要求,说明该中和剂能有效中和最高杀菌试验浓度的消毒剂对试验菌的残留作用。
2.3 悬液定量杀菌试验结果 结果证明,以含过氧化氢30 g/L的该复方消毒剂,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用5 min,平均杀灭对数值分别为5.08和5.33 。
2.4 模拟现场实验结果 用含30 g/L 过氧化氢该复方消毒剂对桌面进行喷雾消毒,作用10 min,对染于桌上的大肠杆菌的杀灭对数均值为3.14。
3 讨论
本研究表明,该过氧化氢复方消毒剂对细菌繁殖体具有良好的杀灭效果,性能稳定,具有一定研究价值。目前各种复方消毒剂都分别从稳定性和杀菌效果等不同方面改善了过氧化氢的性能。
参考文献
[1] 卫生部卫生法制与监督司. 消毒技术规范[S]. 北京:中华人民共和国卫生部, 2002: 15-56.
[2] 葛忆琳, 宦彭成. 过氧化氢的消毒作用及应用[J]. 上海预防医学杂志, 1999,11 (11) : 517.
[3] 崔广华, 刘永新. 新型消毒剂过氢化氢磷酸钠复方物[J]. 河北理工学院学报, 2003,25 (2) : 98.
[4] 蒋兴锦, 汪浩勇, 梁增辉. 抗坏血酸与铜离子协同杀灭微生物效果及其机理的研究[J]. 中国消毒学杂志, 1994,11 ( 3) :140.
文献标识码: A
文章编号: 1672-3783(2008)-9-0033-02
【摘 要】目的 采用悬液定量杀菌试验方法,对某种复方过氧化氢消毒剂杀菌效果进行了试验观察。结果 含30 g/L过氧化氢的该复方消毒剂,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用5 min,平均杀灭对数值均> 5. 0。用含30 g/L过氧化氢的该消毒剂进行擦拭消毒10 min,对染于桌面上的大肠杆菌降低对数值> 3. 00。结论 该复方过氧化氢消毒剂具有良好杀菌作用。
【关键词】过氧化氢;消毒剂;大肠杆菌;金黄色葡萄球菌
Observation on Disinfection performance
of A certain Compound Hydrogen Peroxide Disinfectant
ZHOU Rui-xin
Chengdu Jinjiang Center of Disease Prevention
and Control, Chengdu 610021, Sichuan,China
【Abstract】In order to know the disinfection p roperty of a compound hydrogen peroxide disinfectant, suspension quantita tive germicidal test was used to carry out experimental observation on its germicidal efficacy. Results The average reduction factor ( log10 ) of S taphy lococcus au reus and Escherich ia coli exposed to the compound disinfectant containing hydrogen peroxide 30 g/L for 5 min was 5. 0. Wiping disinfection with the disinfectant containing hydrogen peroxide 30 g/L for 10 min reduced Escherich ia coli on table surface by a logarithm of > 3. 00.Conclusions The compound hydrogen peroxide disinfectant had good germicidal efficacy.
【Key words】Hydrogen peroxide;Disinfectant ; Escherichia coli; S taphy lococcus aureus
过氧化氢( Hydrogen peroxide) 简称H2O2,无色透明液体,属较强氧化剂。杀菌机理主要是形成氧化能力很强的自由羟基,活性衍生物等,破坏微生物的通透性屏障并破坏细菌酶、氨基酸、蛋白质和DNA。过氧化氢优点是使用前不需活化,操作简便,为氧化剂,有利于有机物的去除;无异味,对血液或组织无固定作用。缺点对金属物品有腐蚀性,对橡胶有一定的加速老化的作用,对眼睛有刺激性等。其杀菌作用早在100多年前就已证实,但在消毒领域未引起足够重视。
七十年代以后,新消毒剂较少出现,而H2O2却解决了浓度提高与稳定性问题,由之近年来对其在消毒方面的研究和应用逐渐增多。近些年来,许多研究者对过氧化氢杀灭微生物的效果、消毒机理、增效和稳定方法进行了重新研究,尤其是对协同杀菌作用的研究。与此同时化学消毒剂的复配已成为一个重要的研究方向,这些复方消毒剂单用时的缺点已得到克服,并增加了杀菌灭毒的作用,非常实用。如单使用2000mg/L过氧乙酸有效杀灭脊髓灰质炎病毒I型需5min,而将与80%乙醇混合液使用1min即可达到相同效果。大量实验证明经改进过的复方过氧化氢消毒剂具有较强的杀菌作用。
本试验所用复方过氧化氢消毒剂是一种以硝酸银鳌合物与过氧化氢复配的消毒剂, 含过氧化氢300g/L,为无色透明溶液, pH为1.55。对该复方过氧化氢消毒剂的消毒相关性能,进行了实验室杀菌试验,结果如下。
1 方法
1.1 稳定性试验 将复方过氧化氢消毒剂原液装入密闭的聚乙烯塑料瓶内密封,置54℃恒温箱内储存14 d。于放置前、后分别取样,采用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢含量,计算下降率。
1.2 菌悬液制备 试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC 6538) ,大肠杆菌(8099)。取试验菌营养琼脂培养基斜面新鲜培养物,用5 ml稀释液洗下菌苔,经电动混合器混合20 s,使细菌悬浮均匀,用稀释液配制成试验菌悬液。
1.3 中和剂鉴定试验 试验以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为代表,设平行6组,按悬液定量杀菌试验程序进行。①消毒剂+菌片; ② (消毒剂+菌片) +中和剂;③中和剂+菌片; ④ (消毒剂+中和剂) +菌片; ⑤稀释液+菌片(正常菌对照) ; ⑥稀释液+中和剂+培养基作为阴性对照。试验结果,以第1组不长菌或仅有极少数菌落生长;第2组有菌落生长,较第1组为多,但较第3、4、5组为少;第3、4、5组组间菌落数误差率不超过15%;第6组无菌生长。表明所选中和剂及其浓度适宜。
1.4 悬液定量杀菌试验 在20℃水浴条件下,无菌试管内加入0.5 ml菌悬液与0.5ml有机干扰物(30 g/L牛血清白蛋白) ,混匀;然后加入1.25倍试验浓度的消毒剂4.0 ml,混匀(阳性对照为稀释液) 。作用预定时间,分别吸取0.5 ml样液加入到含4.5 ml中和剂试管内混匀,中和作用10 min。取样液,进行活菌计数培养,计算杀灭对数值。重复3次试验。
1.5 模拟现场消毒试验 选择木质桌面作为试验对象,确定染菌面积为5 cm ×5 cm,取相邻位置4块。取大肠杆菌悬液在选定的面积上进行涂抹染菌,自然晾干。用含30 g/L过氧化氢的复方消毒剂,进行喷雾消毒,每块面积上喷雾1 ml,作用10 min。用沾有含中和剂的采样液对消毒后面积上作涂抹法采样,然后将采样棉拭头置于含中和剂试管内;用同样方法对未经消毒处理的面积上进行采样,作为阳性对照;然后对试验组和对照组进行活菌计数培养,计数细菌总数,计算消毒后细菌减少对数值。重复30个样本。
2 结果
2.1 稳定性实验结果 经观察,该复方过氧化氢消毒剂储存前测定过氧化氢平均含量为298.7 g/L;密封包装于54℃存放14 d后,过氧化氢平均含量为282.2 g/L,平均下降率为5.52%。
2.2 中和剂鉴定试验结果 试验表明,用10 g/L硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲液作为中和剂,符合设计6组长菌数的要求,说明该中和剂能有效中和最高杀菌试验浓度的消毒剂对试验菌的残留作用。
2.3 悬液定量杀菌试验结果 结果证明,以含过氧化氢30 g/L的该复方消毒剂,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用5 min,平均杀灭对数值分别为5.08和5.33 。
2.4 模拟现场实验结果 用含30 g/L 过氧化氢该复方消毒剂对桌面进行喷雾消毒,作用10 min,对染于桌上的大肠杆菌的杀灭对数均值为3.14。
3 讨论
本研究表明,该过氧化氢复方消毒剂对细菌繁殖体具有良好的杀灭效果,性能稳定,具有一定研究价值。目前各种复方消毒剂都分别从稳定性和杀菌效果等不同方面改善了过氧化氢的性能。
参考文献
[1] 卫生部卫生法制与监督司. 消毒技术规范[S]. 北京:中华人民共和国卫生部, 2002: 15-56.
[2] 葛忆琳, 宦彭成. 过氧化氢的消毒作用及应用[J]. 上海预防医学杂志, 1999,11 (11) : 517.
[3] 崔广华, 刘永新. 新型消毒剂过氢化氢磷酸钠复方物[J]. 河北理工学院学报, 2003,25 (2) : 98.
[4] 蒋兴锦, 汪浩勇, 梁增辉. 抗坏血酸与铜离子协同杀灭微生物效果及其机理的研究[J]. 中国消毒学杂志, 1994,11 ( 3) :140.