【摘 要】
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目的 探讨辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN体外稳定转染人胶质瘤SHG-44细胞后联合X射线照射,诱导细胞凋亡的作用及凋亡相关蛋白Bcl-2表达的变化.方法以脂质体介导携有外源野生型PTEN基因的辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN,体外转染SHG-44细胞,筛选稳定转染的细胞克隆并扩增培养;应用电子显微镜、流式细胞仪等方法,检测稳定转染联合X射线照射对胶质瘤细胞超微结构、细胞凋亡及Bcl-2蛋
【机 构】
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100088,北京,中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所,吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物重点实验室,吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物重点实验室,吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物重点实验室
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目的 探讨辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN体外稳定转染人胶质瘤SHG-44细胞后联合X射线照射,诱导细胞凋亡的作用及凋亡相关蛋白Bcl-2表达的变化.方法以脂质体介导携有外源野生型PTEN基因的辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN,体外转染SHG-44细胞,筛选稳定转染的细胞克隆并扩增培养;应用电子显微镜、流式细胞仪等方法,检测稳定转染联合X射线照射对胶质瘤细胞超微结构、细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达等特性的影响.结果稳定转染细胞超微结构有明显的退行性改变,可见核内染色质趋边的类似早期凋亡的改变;稳定转染联合X射线照射可诱导肿瘤细胞凋亡,5 Gy以内随吸收剂量的增加,早期凋亡细胞百分数明显增加,稳定转染不同剂量照射组早期凋亡细胞百分数分别为稳定转染0 Gy假照组的1.5～2.3倍、为未转染照射组的1.9～4.4倍、为未转染0 Gy假照组的3.4～5.1倍;同时稳定转染细胞Bcl-2蛋白表达则呈剂量依赖性下降.结论体外PTEN基因转染联合X射线照射可诱导肿瘤细胞凋亡明显增多,Bcl-2蛋白表达下调,具有显著的肿瘤抑制作用。
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