白藜芦醇对脂多糖诱导人视网膜色素上皮ARPE-19细胞损伤的保护机制研究

来源 :中国中医眼科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lilycasey
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目的 观察白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导人视网膜色素上皮(hRPE)ARPE-19细胞损伤的保护作用,及其对Aldolase/AMPK信号通路的影响.方法 将细胞分为5组:(1)对照组(NC组),采用正常完全培养液培养;(2)LPS组,采用含100 ng/mL的LPS培养液培养;(3)LPS+RES组(LR组),采用100 ng/mL的LPS和40μM的RES共同处理;(4)LPS+二氢脱氧吗啡(CC)组(LC组),采用100 ng/mL的LPS和10μM的CC共同处理;(5)LPS+CC+RES组(LCR组),采用100 ng/mL的LPS和10μM的CC和40μM的RES共同处理.5组均处理24 h后,通过CCK8法和Hoechst染色法检测ARPE-19细胞增殖活性,流式细胞术检测ARPE-19细胞凋亡率和线粒体膜电压(MMP),ATP测定试剂盒分析ARPE-19细胞中ATP含量,Western blot分析ARPE-19细胞中Aldolase和p-AMPK蛋白的表达水平.结果(1)ARPE-19细胞增殖:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=108.412,P=0.000).组间两两比较均有统计学意义(P<0.05).(2)ARPE-19细胞凋亡:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=43.437,P=0.000).组间两两比较均有统计学意义(P<0.05).(3)ARPE-19细胞ATP水平:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=46.803,P=0.000).组间两两比较均有统计学意义(P<0.05).(4)ARPE-19细胞的MMP:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=57.815,P=0.000).与NC组比较,LPS组明显降低(P0.05);与LPS组比较,LR组明显升高(P<0.05).(5)p-AMPK蛋白表达水平:5组比较,差异有统计学意义(F=19.804,P=0.000).与NC组比较,LPS组、LR组和LC组升高(P0.05).与LPS组比较,各组均有统计学意义(P<0.05).与LR组比较,各组均有统计学意义(P0.05).(6)细胞增殖活力:5组比较,差异有统计学意义(F=31.209,P=0.000).与NC组比较,各组均有统计学意义(P<0.05).与LPS组比较,LR组和LC组有统计学意义(P0.05).与LR组比较,各组均有统计学意义(P<0.05).与LC组比较,LCR组升高(P<0.05).(7)ARPE-19细胞Aldolase表达:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=51.024,P=0.000).与NC组比较,各组均有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,LR组升高(P<0.05).结论 RES可通过调节Aldolase/AMPK信号通路活性改善LPS诱导的hRPE细胞损伤.
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